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顯微課堂 | 從概覽中查找相關樣本細節

更新時間:2026-06-23      點擊次數:251

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在從圖像到圖像的搜索中切換到快速查看整個樣本概覽,并即刻識別重要的樣本細節。利用這些知識,使用載玻片、培養皿和多孔板的模板自動設置高分辨率圖像采集。LAS X Navigator 軟件像是樣本細胞的GPS,總能為用戶指明通向高質量數據的清晰路徑,這是生命科學平臺 STELLARIS 和 THUNDER 成像儀上的一款導航工具。LAS X Navigator 支持將寬場、立體或共聚焦實驗與舞臺應用相結合。

用戶可以迅速獲得標本的整體概覽,找到感興趣區域(ROI),然后使用 LAS X Navigator 軟件輕松獲取高分辨率圖像。原因包括:


快速定位樣品

在培養皿中找到標記清晰的細胞或在大塊腦組織切片中找到特定的 ROI 既困難又耗時。因為許多生物樣本的大小超過了顯微鏡的最大視場,這讓用戶很難確定自己在樣本中的位置。

通過 LAS X Navigator 的螺旋掃描功能,可以快速創建樣本概覽,選擇用于進一步研究的 ROI。用戶只需點擊一下,就能獲取以當前視場為中心的馬賽克掃描。

視頻 1:快速螺旋掃描大樣本,以便在選擇 ROI 之前對樣本有一個總體了解。樣本由荷蘭烏特勒支胡布勒支研究所的 Carlos Sacristan Lopez 博士提供。


在不同尺寸比例間無縫工作

用戶在獲取整體樣本的同時,也希望看到精細的樣本細節。這意味著必須在不同尺寸比例間無縫切換。

用戶可以通過 LAS X Navigator 軟件在不同的目標之間迅速切換,并以適當的細節級別掃描樣本。

更換物鏡時,所有相關的拼圖的大小和位置參數都會自動重新計算。此外,查看器功能可以顯示多個記錄的疊加,包括使用不同物鏡獲得的記錄。這樣,用戶可以首先快速獲取概覽,然后使用高分辨率的 z 堆棧從多個任意形狀的ROI 查看細節,從而無縫地在不同尺度上探索樣本。

視頻 2:更換物鏡后放大并掃描標本細節。樣本由荷蘭烏得勒支胡布勒支研究所的 Carlos Sacristan Lopez 博士提供。


在大樣本和時間延遲記錄期間保持對焦

在進行此類實驗時,生物樣本和探針載體通常不是平整的,這些幾何缺陷和樣本在時間延遲記錄期間的漂移都可能導致失焦問題。

LASX Navigator 軟件提供了多種解決這些問題的方法。它可以通過手動或自動定義任意數量的焦點,以創建所謂的“焦點圖",以便對適當的 z 位置進行插值。此外,由于“自適應焦點控制"(AFC)已集成到軟件中,因此提供了一種非侵入性、快速的方法,可以在較長時間內保持樣品對焦。

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圖 1:LAS X Navigator 可以定義任意數量的焦點來構建焦點圖。


陳列編輯和統計抽樣

當用戶希望同時探查多種操作并希望獲得具有統計意義的結果時,自然會選擇使用多孔載體以提高吞吐量。手動設置這類實驗既繁瑣也限制了生產率,因為每個孔都必須手動獲取多個成像位置。

使用 LAS X Navigator 軟件的化驗編輯器(需單獨購買許可證),用戶可以使用包括載玻片、培養皿和多孔板在內的多種常見探針載體。用戶只需選擇正確的載體,并選擇他們希望如何對每個孔進行統計抽樣。這種方法可以快速設置,從而專注于獲取有意義的結果。

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圖 2:化驗編輯器中標準載體的兩個示例。

預定義的 Navigator 可以進一步加快速度。在下面的示例中,使用配備量子臺的 DMi8 寬場系統加載并執行了一個 8 室載玻片協議,每個孔中有 3 個位置。

視頻 3:高速多孔檢測


綜合圖像拼接和分析

獲取高質量數據固然重要,但此時實驗尚未完成。用戶仍然需要拼接單張掃描圖像并進行圖像分析。為此,LASX Navigator 軟件為此類工作流程提供了便利: 圖像采集完成后,可選擇使用選定的拼接算法自動合并單個拼圖。此外,三維分析模塊(許可證可單獨獲?。┑奶幚砉δ芤鸭傻杰浖校灾С终麄€工作流程。例如,處理流水線可用于描述剛剛記錄的細胞核,即分割細胞核、計數細胞核、測量細胞核大小等。

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圖 3:LAS X 導航儀拼接圖像上的 3D 分析模塊。


圖像融合,整合外部圖像信息

如果樣品的預掃描已經用另一個系統(例如徠卡寬場顯微鏡)完成,而現在需要用 STELLARIS 共聚焦顯微鏡進行高分辨率掃描,該怎么辦?用戶自然希望將這些成像數據結合起來。不同來源的圖像可以通過 LAS X Navigator 軟件進行導入和對齊。

用戶只需選擇要導入軟件的圖像,然后使用工具箱快速對齊圖像。這樣,即使是智能手機攝像頭的快照也可以用作鳥瞰圖,用于定義 ROI 并自動掃描。

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圖 4:LAS X 導航儀可從其他來源導入圖像。在所示示例中,共焦圖像與相機快照對齊。


將基于熒光壽命的成像技術與 STELLARIS

(TauSense 和 FALCON)相結合

有時,用戶需要分離光譜重疊的熒光團,減少對信號的無用貢獻或研究微環境變化。雖然基于強度的成像信息仍然是熒光顯微鏡使用最多的維度,但許多人已經學會欣賞基于熒光壽命的成像。

LASX 導航儀允許用戶通過載物臺應用程序獲取熒光壽命數據。

TauSense 工具可用于 LASX 導航儀,使用 TauContrast 記錄平均到達時間的差異,或使用 TauSeparation 區分某些光譜重疊的熒光團。此外,FALCON 與 LASX Navigator 兼容。

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圖 5:蛔蟲橫切面上不同結構的識別。將基于熒光壽命的信息和熒光強度與階段應用相結合,可提供額外的對比度來區分不同的結構。LAS X 導航儀可在整個標本上無縫執行這項任務。


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